Detecção de Periodontopatógenos, Glicoproteína Emmprin (Cd-147) e sua correlação com MMP-2 e MMP-9 / Detection of Periodontopathogens, Glycoprotein Emmprin (CD-147) and its Correlation whith MMP-2 and MMP-9

A periodontite é uma doença infecciosa caracterizada pela secreção de uma variedade de mediadores inflamatórios que levam a destruição dos tecidos de suporte dental e possível perda dos dentes, em associação com a infecção por múltiplas espécies bacterianas. Estima-se que mais de 400 espécies colonizam o biofilme dental e algumas das espécies bucais relacionadas à doença periodontal estejam no biofilme subgengival como Porphyromonas gingivalis, Tannerella forsythia, Treponema denticola. Entretanto, outros microrganismos podem estar relacionados a patologia desta doença, como Filifactor alocis e Prevotella tannerae. Esses microrganismos e seus subprodutos, como endotoxinas liberados o meio extracelular, levam ao estímulo da glicoproteína indutora de metaloproteinase (EMMPRIN, CD-147), que estimula a liberação de MMPs por fibroblastos e células endoteliais, levando a destruição do tecido. Com o objetivo de detectar F. alocis, P. tannerae e T. denticola, glicoproteina EMMPRIN (CD-147) e sua correlação com MMP-2 e MMP-9, amostras de fluido subgengival de pacientes com periodontite crônica, foram coletados de sítios sadios e doentes antes do tratamento periodontal básico e após 60 dias do tratamento. Os respectivos DNAs das bactérias foram extraídos e trechos do gene 16S foram amplificados e posteriormente realizados PCR convencional para a análise microbiológica dos microrganismos. Para a quantificação do EMMPRIN (CD-147), MMP-2 e MMP-9 foi usado ELISA-Sandwich. Resultados demonstraram que o grupo doente aumentou significantemente T. denticola, F. alocis e P. tannerae quando comparados com sítios saudáveis. MMP-2 e MMP-9 foram detectados em altas concentrações com redução estatisticamente significante após tratamento periodontal para MMP-2, mas não houve correlação com EMMPRIN.

Periodontitis is an infectious disease characterized by thesecretion of a variety of inflammatory mediators that lead todestruction of tooth supporting tissues, including the possibleloss of alveolar bone, in association with infection with multiplespecies of bacteria. It is estimated that more than 400 speciescolonize the biofilm and some oral species related to periodontaldisease is present in the subgingival including P. gingivalis, T.forsythia and T. denticola. However, other organisms may berelated of this disease, as Filifactor allocis and Prevotella tannerae.These microorganisms and subproducts such as endotoxinsreleased into the extracellular lead to the stimulation of metalloproteinaseinducer glycoprotein (EMMPRIN, CD-147), whichstimulates the release of MMPs by host cells, like fibroblasts andendothelial cells, thus leading to tissue destruction. The objectiveof this study was to detect F. allocis, P. tannerae, T. denticolaand the glycoprotein EMMPRIN (CD-147) and its correlationwith MMP-2 and MMP-9 in subgingival fluid samples of patientswith chronic periodontitis. Fluids were collected from healthyand disease subgingival sites of 20 healthy individuals beforebasic periodontal treatment and after of 60 days of treatment.Their DNAs were extracted and portions of the 16S gene wereamplified and performed conventional PCR. For immunologicalanalysis and quantification of EMMPRIN (CD-147), MMP-2 andMMP-9 was used ELISA-Sandwich. Results demonstrated thatthe disease group showed significantly high amounts of T. denticola,F. alocis and P. tannerae when compared with health sites.MMP-2 and MMP-9 were detected in high concentrations withstatistically significantly reduction after periodontal treatment toMMP-2, but without correlation with EMMPRIN.

Diretrizes para o tratamento periodontal e acompanhamento durante o tratamento ortodôntico / Guidelines for periodontal care and follow-up during orthodontic treatment

Objetivo deste trabalho foi, através de uma revisão da literatura, ressaltar os cuidados antes, durante e depois do tratamento ortodôntico em pacientes com doença periodontal. Diante da literatura exposta, foi possível verificar que o tratamento ortodôntico em pacientes saudáveis não traz nenhum risco ao periodonto, mas a presença de doença periodontal ativa contraindica a movimentação dentária. Por isso, é extremamente importante antes de iniciar a terapia ortodôntica, executar um diagnóstico correto das alterações periodontais e tratá-las; e durante toda a terapia ortodôntica, ter um controle periodontal com reavaliações periódicas. Além disso, ao final do tratamento ortodôntico, aconselha-se fazer uma nova orientação de higiene oral e estabelecer a manutenção de acordo com a exposição aos fatores de riscos do paciente a doença periodontal.

The aim of this paper was to search though a revision of the literature the cares before, during and after the orthodontic treatment in patients with a periodontal disease. The literature shows that the orthodontical treatment in healthy patients brings no risk to the periodontium, although the presence of an active periodontal disease counter indicates the dental movement. Thus, it is extremely important to execute a correct diagnosis of any periodontal alteration and treat them before the beginning of the orthodontical treatment. Besides, during the whole orthodontical treatment is also important to have a periodontal control with periodic reevaluations and at the end of the orthodontical treatment, a new oral hygiene orientation may be needed to finally establish the follow-up of the patient according to the risk of periodontal disease.

In Vitro effect of low-level laser therapy on typical oral microbial biofilms

The aim of this study was to evaluate the effect of specific parameters of low-level laser therapy (LLLT) on biofilms formed by Streptococcus mutans, Candida albicans or an association of both species. Single and dual-species biofilms - SSB and DSB - were exposed to laser doses of 5, 10 or 20 J/cm2 from a near infrared InGaAsP diode laser prototype (LASERTable; 780 ± 3 nm, 0.04 W). After irradiation, the analysis of biobilm viability (MTT assay), biofilm growth (cfu/mL) and cell morphology (SEM) showed that LLLT reduced cell viability as well as the growth of biofilms. The response of S. mutans (SSB) to irradiation was similar for all laser doses and the biofilm growth was dose dependent. However, when associated with C. albicans (DSB), S. mutans was resistant to LLLT. For C. albicans, the association with S. mutans (DSB) caused a significant decrease in biofilm growth in a dose-dependent fashion. The morphology of the microorganisms in the SSB was not altered by LLLT, while the association of microbial species (DSB) promoted a reduction in the formation of C. albicans hyphae. LLLT had an inhibitory effect on the microorganisms, and this capacity can be altered according to the interactions between different microbial species.

O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito de parâmetros específicos de irradiação com laser de baixa intensidade sobre biofilmes formados por Streptococcus mutans (S. mutans), Candida albicans (C. albicans) ou associação de ambas as espécies. Biofilmes isolados ou associados destes microrganismos foram irradiados com um dispositivo laser infra-vermelho próximo de diodos InGaAsP (LaserTABLE 780 ±3 nm, 0,04W), utilizando-se para isto o dispositivo LASERTable. Quinze horas após a irradiação, foi demonstrado, por meio da avaliação da viabilidade celular (Teste de MTT), da morfologia das células (MEV) e do crescimento do biofilme (UFC/mL), que esta terapia foi capaz de reduzir o metabolismo celular, número de microrganismos presentes no biofilme, bem como seu crescimento no local. Quanto à viabilidade celular, a resposta à irradiação do biofilme de S. mutans (SSB) foi semelhante para todas as doses de energia, sendo que o crescimento do biofilme foi dose dependente. Porém, quando associado à C. albicans, este microrganismo apresentou resistência à fototerapia. Já a C. albicans associada ao S. mutans apresentou redução de crescimento significativa, sendo este resultado também foi dose dependente. A morfologia dos microrganismos não foi alterada pelas irradiações realizadas quando em biofilmes isolados. A associação entre os microrganismos promoveu redução na formação de hifas pela C. albicans. A laserterapia de baixa intensidade apresentou efeito inibitório sobre microrganismos, sendo que esta capacidade pode ser alterada de acordo com a interação entre diferentes microrganismos.

Patógenos periodontais: comparação entre cultura bacteriana e PCR em tempo real para teste diagnóstico / Periodontal pathogens: comparison between culture and real time PCR for diagnostic assay

A correta distinção dos microrganismos envolvidos na patogênese da doença periodontal, torna-se importante para o entendimento da sua progressão e adequado plano de tratamento. Métodos de identificação e quantificação foram desenvolvidos e são considerados extremamente sensíveis e precisos na caracterização das espécies bacterianas. Com isso a presente revisão mostra trabalhos existentes na literatura, os quais analisaram comparativamente os métodos de Reação em Cadeia da Polimerase em tempo real (qPCR) e cultura bacteriana com objetivo na identificação de periodontopatógenos. Através do método de cultura bacteriana é possível a identificação de novos microrganismos e realização de testes de sensibilidade a antibióticos. O qPCR é um teste microbiológico que identifica e quantifica espécies bacterianas, através da amplificação gênica de fragmentos de DNA pré-determinados, com alta sensibilidade, especificidade e dispendem menor tempo do operador quando comparados a cultura bacteriana. Assim para a escolha de um determinado teste diagnóstico deve-se levar em consideração não somente a sua precisão na identificação dos micro-organismos, mas também a relação custo-beneficio.

The correct distinguishment of microorganisms involved in the periodontal disease pathogen, it is important in the understanding of its progression and adequate treatment planning. Considering this fact, some molecular methods of identification and quantification were developed and are extremely sensitive and precise in the characterization of different bacteria species. The present study aimed to realize a literature review, including studies that realized a comparative analysis between bacterialculture and real time PCR methods in the identification of pathogens. The bacterial culture method can possibly identify new microorganisms and realize antibiotics sensitivity tests. The real time PCR is a microbiologic test that identifies and quantifies bacterial species, through gene amplification of predetermined DNA fragments, with high sensitivity and specificity, and need a shorter operation time of the operator when compared to thebacterial culture method. In this way, to determine a specific diagnostic test, should be considered not only its precision in the identification of microorganisms, but the cost-benefit relationship as well.

Efeito antimicrobiano e citotóxico do óleo essencial de cymbopogon citratus sobre células odontoblastóides / Antimicrobial and cytotoxic effects of the essential oil of cymbopogon citratus on odontoblast-like cells

O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade antimicrobiana e o efeito citotóxico do óleo essencial (OE) de capim-limão (Cymbopogon citratus). A partir do método de difusão em ágar, diferentes concentrações de OE (0,1%; 0,2% e 1%), e soluções controle (clorexidina (Chx), água destilada (Ad) e álcool de cereais (Ac) foram aplicados sobre culturas de Candida albicans (C.a), Streptococos mutans (S.m), Streptococos sobrinus (S.sob) e Lactobacilus acidoflus (L.a). Para C.a, S.m e S.sob, os maiores halos de inibição, em ordem decrescente foram: Chx, Ac e óleo 1%, sendo os dois últimos semelhantes estatisticamente (Mann-Whitney, p>0,05). Para L.a, o maior halo de inibição foi observado para a Chx, seguido do óleo a 1%, 0,2%, 0,1% e Ac. Para avaliação da citotoxicidade foram determinados os seguintes grupos: OE a 0,1%; G2: OE puro; G3 (controle positivo): H2O2; G4: álcool de cereais (Ac); e G5 (controle negativo): meio de cultura (DMEM). As soluções foram aplicadas sobre cultura de células MDPC-23 (30.000 células/cm2) semeadas em placas de 24 wells. O metabolismo celular foi avaliado pelo teste do MTT. Considerando G5 como 100% de metabolismo celular, foi observado para os grupos G1, G2, G3, e G4 uma redução percentual no metabolismo das células de 29,6%; 82%; 81,2%; e 33,4%, respectivamente. Concluiu-se que o OE a 0,1% foi capaz de inibir o crescimento das cepas avaliadas e de causar discreta citotoxicidade sobre células odontoblastóides MDPC-23.

The aim of this study was to evaluate the antimicrobial and cytotoxic efect of essential oil (EO) of lemon grass (Cymbo-pogon citratus). From the agar difusion method, diferent concentrations of EO (0.135%, 0.2% and 1%), and control solutions (chlorhexidine (Chx), distilled water (Ad) and cereal alcohol (Ac)) were applied on cultures of Candida albicans (C.a), Streptococcus mutans (S.m), Streptococcus sobrinus (S.sob) and Lacto-bacillus acidophilus (L.a). For C.a, S.m and S.sob, the largest inhibition zones in descending order were: Chx, Ac and EO 1%, while the later two were statistically similar (Mann-Whitney, p> 0.05). For L.a, the largest inhibition halo was observed for the Chx, followed by EO at 1%, 0.2%, 0.135% and Ac. For evaluation of cytotoxicity, the following groups were set: G1: 0,1% EO; G2: pure EO; G3 (positive control): H2O2; G4: cereal alcohol; and G5 (negative control): culture medium - DMEM. The solutions were applied on the cultured MDPC-23 cells, which were plated (30,000 cells/cm2) in wells of 24 well-dishes. Cell metabolism was evaluated by MTT assay. Considering G5 (negative control) as 100% of cell metabolism, it was observed for G1, G2, G3 and G4 a percentage reduction in cell metabolism of 29.6%, 82%, 81.2% and 33.4%, respectively. It was concluded that the low concentration of 0,1% OE (C. citratus) was able to inhibit the growth of the strains tested as well as caused mild cytotoxicity to the cultured MDPC-23 cells.

Invasão microbiana: infecção focal e a relação com aterosclerose / Microbial Invasion: focal infection and relationship with atherosclerosis

Os extraordinários avanços no desempenho de técnicas laboratoriais corroboram na evolução do entendimento dos mecanismos das doenças de modo geral, facilitando o tratamento e/ou a prevenção. De fato, informações equilibradas, curadas e atuais estão colaborando de forma estimulante no estudo da relação entre doença periodontal e periapical crônica com o desenvolvimento ou estabelecimento de algumas doenças cardiovasculares. Dessa forma, o objetivo da presente trabalho foi descrever de forma sucinta e objetiva a relação entre doença periodontal crônica e doença periapical como fatores de risco para o desenvolvimento ou estabeleciomento da aterosclerose. Estudos epidemiológicos têm procurado demonstrar que indivíduos com doença periodontal ou periapical poderiam apresentar um aumento significativo do risco de desenvolver algumas doenças sistêmicas incluindo a aterosclerose.

New strategies on molecular biology applied to microbial systematics

Sistematica e o estudo da diversidade dos organismos e suas relacoes, compreendendo classificacao, nomenclatura e identificacao. O termo classificacao ou taxonomia relaciona-se ao arranjo dos organismos em grupos, nomenclatura e a atribuicao de nomes cientificos internacionais corretos aos organismos e identificacao e a inclusao de linhagens desconhecidas em grupos derivados da classificacao. Portanto, a classificacao requer previamente, uma nomenclatura estavel e uma perfeita identificacao. O limiar da nova era da Sistematica bacteriana, pode ser atribuido a introducao e aplicacao dos novos conceitos taxonomicos, a partir das decadas de 1950 e 1960. Progressos taxonomicos foram conseguidos empregando-se recursos de taxonomia numerica e a taxonomia molecular...